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小鼠抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa試劑盒
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品牌:原鑫生物
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小鼠抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa試劑盒

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小鼠抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠TAT抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的小鼠TAT會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠TAT抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗小鼠TAT抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠TAT結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,TAT濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中TAT的濃度。


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越來越多的證據(jù)表明凝血酶是凝血級聯(lián)反應(yīng)的主要效應(yīng)物,在哮喘發(fā)病機制中起重要作用。有趣的是,臨床抗凝藥物達比加群直接抑制凝血酶活性。本研究的目的是在體內(nèi)和體外研究達比加群對氣道平滑肌重塑的影響和機制。在這里,我們發(fā)現(xiàn)達比加群減輕了哮喘小鼠肺部的炎癥病理、粘液產(chǎn)生和膠原蛋白沉積。此外,達比加群抑制哮喘小鼠氣道平滑肌中 Yes 相關(guān)蛋白 (YAP) 的激活。在人氣道平滑肌細胞 (HASMC) 中,達比加群不僅減輕了凝血酶誘導(dǎo)的 I 型膠原、α-SMA、CTGF 和細胞周期蛋白 D1 的增殖、遷移和上調(diào),但也抑制了凝血酶誘導(dǎo)的 YAP 激活,而 YAP 激活介導(dǎo)了凝血酶誘導(dǎo)的 HASMC 重塑。


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從機制上講,凝血酶通過 PAR1/RhoA/ROCK/MLC2 軸促進肌動蛋白應(yīng)激纖維聚合以激活 YAP,然后與細胞核中的 SMAD2 相互作用以誘導(dǎo)下游靶基因,最終加劇 HASMC 重塑。我們的研究提供了實驗證據(jù),表明達比加群通過抑制 YAP 信號傳導(dǎo)改善哮喘氣道平滑肌重塑,并且達比加群可能具有治療哮喘的治療潛力。凝血酶通過PAR1/RhoA/ROCK/MLC2軸促進肌動蛋白應(yīng)激纖維聚合以激活YAP,然后與細胞核中的SMAD2相互作用以誘導(dǎo)下游靶基因,最終加劇HASMCs重塑。我們的研究提供了實驗證據(jù),表明達比加群通過抑制 YAP 信號傳導(dǎo)改善哮喘氣道平滑肌重塑,并且達比加群可能具有治療哮喘的治療潛力。


凝血酶通過PAR1/RhoA/ROCK/MLC2軸促進肌動蛋白應(yīng)激纖維聚合以激活YAP,然后與細胞核中的SMAD2相互作用以誘導(dǎo)下游靶基因,最終加劇HASMCs重塑。我們的研究提供了實驗證據(jù),表明達比加群通過抑制 YAP 信號傳導(dǎo)改善哮喘氣道平滑肌重塑,并且達比加群可能具有治療哮喘的治療潛力。


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