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人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA Kit試劑盒/測試盒 |
品牌:原鑫生物
貨號:YX-131856
規格:48T/96T
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人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA Kit試劑盒/測試盒 
詳細信息 貨號:YX-131856 品牌:原鑫生物 供應商:上海原鑫生物科技有限公司 檢測限:1pg/mol 檢測方法:酶聯免疫法/雙抗夾心法 樣本:血清,血漿,細胞,組織,體液等 規格:48T/96T 產品優勢:上海原鑫生物的試劑盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,適用多種標本類型并節約成本。其高效、靈敏、特異的抗體與高效、靈敏、特異的抗體使實驗曲線更完美。是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產品。 檢測范圍:7pg/ml-220pg/ml 使用目的:本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。 實驗原理 本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中山羊小反芻獸疫抗體(PPRAb)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入小反芻獸疫抗體(PPRAb),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小反芻獸疫抗體(PPRAb)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中山羊小反芻獸疫抗體(PPRAb)濃度。儀器、原料和試劑儀器聚苯乙烯96孔酶標板、微量移液管、酶聯免疫閱讀儀、洗板儀。 標本要求 1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融 2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 試劑及試劑配制 1.抗原及酶標記抗體 ①抗原:IgG ②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP 2.包被液(CBS):Na2CO30.8g,NaHCO31.46g,水溶解,定容500ml。 3.封閉液(3%BSA+CBS或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mLCBS中加入0.3gBSA。含5%荷蘭牛奶:10mLCBS中加入0.5g牛奶。 4.洗滌液(PBST10*):KH2PO44g,Na2HPO4·12H2O58g,NaCl160g,KCl4g,Tween-2010mL加水定容2L。 5.洗滌液(1*PBS):PBST:H2O=1:9 6.底物溶液(4甲基酰苯氨)①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O:1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調PH=3.6。②TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)0.08g溶于40mL二甲基亞砜(DMSO)中,加60mL甲醇,混勻,加100mL底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。③H2O2底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。④底物應用液:現用現配,TMB:H2O2=1:1混勻。 7.終止液:2mol/LH2SO4 四、操作步驟 ①抗原包被過夜(12h以上):IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度(N為板數) ②封閉:棄上清加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。 ③洗滌:用洗滌液洗3次 ④加一抗(待測樣品為細胞培養上清):將含單克降抗體的細胞培養上清100μL/孔加到已包被的板上,空白培養基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續倍比稀釋(按照1:200開始),100μL/孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 ⑤洗滌:用洗滌液洗5次。 ⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBSTl:10000稀釋,100μL/孔,37℃恒溫箱溫育1h。 ⑦洗滌:用洗滌液洗5次, ⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色。 ⑨終止反應、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm630nm處各孔的吸光值,陽性反應的最大稀釋度為待測樣品的效價。
研發、生產科研產品:
ELISA試劑盒:多種屬、1000多種指標:人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗1萬余種,二抗100多種; 重組蛋白:多項發明專利,原核表達系統穩定表達蛋白1000余種。 在線聯系:(周經理) 17621047120QQ:2441609688(任經理) 官方電話: 400-788-2680 更多elisa試劑盒:http://www.cjs100.cn/product-32-1-1.html
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