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人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

本章簡述人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書,由于文章信息較大,所以在此對說明書進行分樣發布,需要詳細人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書的可以致電原鑫生物科技獲取或直接到官方網站進行下載。承接人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(一)的部分,本篇具體說明人白細胞介素6ELISA試劑盒需要自備的實驗材料、樣本手機和儲存、試劑盒的準備以及檢測步驟,供各位科研人員進行參考。

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

一.首先看看人白細胞介素6elisa試劑盒組成以及存儲的知識

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

二. 再來看看人白細胞介素6ELISA試劑盒需要實驗用的器材

1. 酶標儀

2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl

3. 洗板機

4. 37℃孵育箱

5. 超純水,去離子水

6. 一次性稀釋用聚丙烯試管


三.樣本收集及儲存

1. 細胞培養上清: 將細胞培養基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并 于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

2. 血清樣本: 室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。

3. 血漿樣本: 將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混 合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

4. 

需要注意的是:血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高 于標準品的最高值,請將樣品做適當倍數稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數。


四.人白細胞介素6ELISA試劑盒的準備工作

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下復溫。

2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用超純水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋 成 1 倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。

3. 標準品梯度稀釋:在標準品中加入1ml標準品稀釋液至完全溶解,按照濃度為350pg/ml、175pg/ml、87.5pg/ml、43.75pg/ml、21.88pg/ml、10.94pg/ml、5.47pg/ml進行等比稀釋,具體操作如下圖所示。


五.人白細胞介素6ELISA試劑盒檢測步驟

1 按照實驗設計,在標準品與樣本孔中加樣100ul,空白對照不加    

2 25℃避光孵育2h      

3 棄去液體,用洗滌液清洗4次,每次每孔至少加洗滌液300ul,洗完后吸水紙上拍干

4 加入酶標抗體溶液100ul,空白對照不加,25℃避光孵育1h      

5 同步驟3      

6 每孔加入底物A、B各50ul,25℃避光孵育20min,顯色淺可適當延長孵育時間

7 加入終止液50ul,10min內在450nm波長處測OD值


以上就是人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)的相關理論和知識,下一篇上海原鑫生物科技有限公司將繼續分享人白細胞介素6ELISA試劑盒其他的說明。

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