生理生化檢測 - 植物類黃酮的代測檢測服務說明

本篇簡介關于植物類黃酮的代測檢測服務說明,文章出處上海原鑫生物科技有限公司專業科員人員。 產品說明: 類黃酮是一-類多 苯化合物,屬于植物次生代謝物,對人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內羥自由基,預防癌癥等作用。 自備實驗用品及儀器:天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。 檢測方法: 在分光光度計中,將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長(λ)為橫坐標,吸收強度(A)為縱坐標,就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質的方法,稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質的方法,稱為可見光光度法。它們與比色法一樣,都以Beer-Lambert定律為基礎。 上述的紫外光區與可見光區是常用的。但分光光度法的應用光區包括紫外光區,可見光區,紅外光區。波長范圍: (1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區, (3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。 紫外-可見分光光度計由5個部件組成:①輻射源。必須具有穩定的、有足夠輸出功率的、能提供儀器使用波段的連續光譜,如鎢燈、鹵鎢燈(波長范圍350~2500納米),氘燈或氫燈(180~460納米),或可調諧染料激光光源等。②單色器[1] 。它由入射、出射狹縫、透鏡系統和色散元件(棱鏡或光柵)組成,是用以產生高純度單色光束的裝置,其功能包括將光源產生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束。③試樣容器,又稱吸收池。供盛放試液進行吸光度測量之用,分為石英池和玻璃池兩種,前者適用于紫外到可見區,后者只適用于可見區。容器的光程一般為0.5~10厘米。④檢測器,又稱光電轉換器。常用的有光電管或光電倍增管,后者較前者更靈敏,特別適用于檢測較弱的輻射。近年來還使用光導攝像管或光電二極管矩陣作檢測器,具有快速掃描的特點。⑤顯示裝置。這部分裝置發展較快。較高級的光度計,常備有微處理機、熒光屏顯示和記錄儀等,可將圖譜、數據和操作條件都顯示出來。 儀器類型則有:單波長單光束直讀式分光光度計,單波長雙光束自動記錄式分光光度計和雙波長雙光束分光光度計。 應用范圍包括:①定量分析,廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機和有機物質的測定。②定性和結構分析,紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應、氫鍵的強度、互變異構、幾何異構現象等。③反應動力學研究,即研究反應物濃度隨時間而變化的函數關系,測定反應速度和反應級數,探討反應機理。④研究溶液平衡,如測定絡合物的組成,穩定常數、酸堿離解常數等。 比色法 供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。 用比色法測定時,應取數份梯度量的對照品溶液,用溶劑補充至同一體積,顯色后,以相應試劑為空白,在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標繪制標準曲線,再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度,并求出其含量。 也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作,顯色后,以相應的試劑為空白,在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度,按上述(1)法計算供試品溶液的濃度。 除另有規定外,比色法所用空白系指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理制得。
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