土壤有效硼;測定方法;注意事項
硼是植物正常生長發(fā)育不可缺少的微量元素,能夠促進植物生長茂盛和生殖器官的正常發(fā)育,有利于開花結實,促進作物早熟,提高產量和品質。土壤缺硼,易使作物根尖分生組織的細胞分化和伸長受到抑制,發(fā)生木栓化而壞死,并形成“蕾而不花”、“花而不實”、“有殼無仁”及“不穗癥”等,嚴重影響農作物的產量和品質;但供硼過多會使作物形成硼中毒,因此根據(jù)土壤有效硼含量,合理供給硼元素是提高作物產量和品質的關鍵措施之一。土壤有效硼的檢測準確度是制定施硼數(shù)量的重要依據(jù),現(xiàn)就土壤有效硼檢測方法介紹如下。
1主要儀器
實驗所用的儀器主要有分光光度計、石英三角瓶(250mL)、10mL的比色管、2cm光徑比色皿、石英回流冷卻裝置等。
2試劑配制
2.1高錳酸鉀溶液的配制稱取高錳酸鉀31.606g溶于水中,稀釋至1L。
2.23mol/L 硫酸溶液的配制量取濃硫酸168mL,緩慢加入到盛有約800mL水的大燒杯中,不斷攪拌,冷卻后,稀釋至1L。
2.3酸性高錳酸鉀溶液的配制將2.1、2.2中配制的高錳酸鉀溶液與硫酸溶液等體積混合。
2.410%(m/v)抗壞血酸溶液的配制稱取抗壞血酸10g溶于水中,稀釋至100mL。
2.510%的硫酸鎂溶液的配制稱取10.0g硫酸鎂溶于水中,稀釋至100mL。
2.60.90%甲亞胺溶液的配制稱取甲亞胺0.90g和抗壞血酸2g溶于微熱的60mL水中,稀釋至100mL。
2.7pH值5.6～5.8緩沖液的配制稱取250g乙酸銨和10.0g EDTA二鈉鹽溶于水中,冷卻后稀釋至500mL,再加入80mL 1:4硫酸溶液,搖勻用酸度計檢查pH。
2.8混合顯色劑的配制3份(體積)甲亞胺溶液和2份pH值5.6～5.8緩沖液混合。
2.9硼標準系列溶液的配制稱取預先干燥24h的硼酸(優(yōu)級純)0.5719g于400mL燒杯中,加無硼水溶液,移入1L容量瓶中定容,貯于塑料瓶中。吸取50.00mL上述溶液于500mL容量瓶中,定容,即為10μg/mL硼標準系列溶液,貯于塑料瓶中。分別吸取0.0mL、0.50mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于7個50mL容量瓶中,定容,即為0.0 mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.40mg/mL、0.60mg/mL、0.80mg/mL、1mg/mL硼標準系列溶液,貯于塑料瓶中。
3操作步驟
①稱取通過2mm孔徑尼龍篩的風干土樣10g于250mL石英三角瓶中,加入20mL水,裝好回流冷凝器,文火煮沸并保持微沸5min(準確計時),移開熱源,繼續(xù)回流冷凝5min(準確計時),取下三角瓶,冷卻。同時做空白試驗。②在煮沸過的樣品溶液中加入2滴硫酸鎂溶液加速澄清,1次性傾入濾紙上,濾液承接于塑料瓶中。③吸取4mL濾液于10ml比色管中,加入0.50mL酸性高錳酸鉀溶液,搖勻,放置2～3min;加入0.50mL抗壞血酸溶液,搖勻;待紫紅色消退且二氧化錳沉淀完全溶解后,加5mL混合顯色劑,搖勻;放置1h后,在分光光度計上于波長415nm處,用2cm光徑比色皿比色測定,讀取吸光度,以扣除空白后的吸光值查校準曲線得到測定液的含硼量。用同樣方法做標準曲線。
4結果計算
有效硼(mg/kg)=(m1×D/m×103)×1000
式中:m1為顯色液中硼的的含量(μg),D為分取倍數(shù)(20/4),m為試樣質量。103 和1000為換算系數(shù)。
5注意事項
①硼標準系列溶液、高錳酸鉀溶液和硫酸溶液應貯于塑料瓶中。高錳酸鉀溶液和抗壞血酸要現(xiàn)用現(xiàn)配。②因甲亞胺試劑本身顏色較深,影響吸光度,加入5mL混合顯色劑用胖肚吸管,提高準確率,減少誤差。③由于溶液吸光度在分光光度計內不太穩(wěn)定,每批樣品要在1h內完成。④每10個土樣做1個平行測定,平行測定結果以算術平均值表示,保留2位小數(shù),允許絕對誤差。⑤甲亞胺-H比色法適合較高濃度的測定。不同土壤含量的檢測靈敏度不同,甲亞胺藥品質量對測量結果影響較大。一般優(yōu)質產品顏色黃亮,無雜質,若有暗黃色雜質、黑色沉淀物較多為劣質藥品,測量結果不理想,所以一定選用優(yōu)質甲亞胺藥品。吸取的濾液放在塑料比色管中。塑料比色管一定要清洗干凈,以最大可能減少誤差。在閉光、恒溫的條件下,放在25℃保溫箱中1～2h,再用分光光度計測定。 上海原鑫品牌優(yōu)勢 1、產品優(yōu)勢：產品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好； 2、質量保證：產品質量穩(wěn)定，每批次產品必須通過QA、QC檢測才可出庫； 3、實力強大：ISO9001:2015認證，標準實驗室、研發(fā)中心，動物房，高新技術企業(yè)； 4、技術支持：技術部5*8小時技術問題及時解答； 5、服務周到：發(fā)貨及時，三個工作日順豐快遞；售后無憂，包退包換。 研發(fā)、生產科研產品： ELISA試劑盒：多種屬、1000多種指標：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗1萬余種，二抗100多種； 重組蛋白：多項發(fā)明專利，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白1000余種。 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 在線聯(lián)系：17621047120（周經(jīng)理） QQ：2441609688 （任經(jīng)理） 官方電話：400-788-2680 更多生化生理代測檢測服務：http://www.cjs100.cn/daice-34-1-1.html |
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