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人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒的使用方法

人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒的使用方法如下:

  1. 試劑準備

    • 將所有試劑和樣本緩慢平衡至室溫(18-25℃),避免直接在37℃下溶解。

    • 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,室溫靜置約10分鐘,反復顛倒以助溶解。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成不同的梯度。

    • 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。

  2. 操作步驟

    • 樣品準備:將待測樣本按照說明書要求進行稀釋,并加入到相應的反應孔中。

    • 包被板處理:將預包被狂犬病毒抗原的微孔板取出,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

    • 加入生物素標記物:向每個反應孔中加入適量的生物素標記的單克隆抗體,4℃過夜孵育。

    • 洗滌:次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。

    • 加入HRP酶聯物:向每個反應孔中加入HRP標記的酶聯物,室溫孵育30分鐘。

    • 再次洗滌:用洗滌緩沖液洗3次。

    • 加入底物液:向每個反應孔中加入底物液A和底物液B,避光反應10-15分鐘。

    • 讀數:在酶標儀上于450nm波長下測定吸光度(OD值),記錄數據。

  3. 結果計算

    • 根據標準曲線計算樣本中狂犬病毒糖蛋白的濃度。

    • 陰性判斷、弱陽性判斷和陽性判斷均需參考試劑盒提供的標準曲線和Cut-off值。

  4. 注意事項

    • 試劑盒需在4℃保存,開封后應在10天內使用完畢。

    • 使用新鮮樣本或-20℃保存樣本以確保檢測結果的準確性。

    • 操作過程中需避免交叉污染,確保每一步的精確性。

注:原鑫生物這款人狂犬病毒抗原ELISA試劑盒基于競爭法原理,通過狂犬病毒糖蛋白與生物素標記的單克隆抗體的特異性反應,定量檢測狂犬病毒滅活樣本中的病毒糖蛋白成分,適用于科研領域。


 

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