elisa檢測試劑盒常見的10種測定問題與解答 
elisa檢測試劑盒對于科研實驗人員來說，不僅需要嚴格進行說明閱讀、依照elisa檢測試劑盒說明書進行實驗操作，還需要強大的耐心與分析能力，而相對于即將畢業的科研人員來說就更需要一份簡單明了的elisa檢測試劑盒說明書或者相關老手來輔助進行檢測試劑盒的操作了，下面原鑫生物關于elisa試劑盒常見問題羅列10點，以便相關實驗研究新手方便易懂。
問題一 問：elisa檢測試劑盒如何進行預測定，實驗方案如何調整？ 答：為了保證測定結果的準確性，避免時間和材料的損失，正式試驗前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本進行預測定， 并制作標準曲線；根據預測定結果確認是否需要調整樣本量、提取過程中料液比是否需要調整、過程中料液比是否 需要調整、標準線性是否滿足要求等。預實驗結果評價過程中的任何問題均可與專屬技術專員聯系。
問題二 問：elisa檢測試劑盒如何選擇合適的比色皿和微孔板？ 答：①通常采用玻璃或石英兩種材質的比色皿：紫外分光光度法通常使用石英比色皿（口沿處有標有 Q），可見分光光 度法通常使用玻璃比色皿（口沿處有標有 G）。 ②按說明書要求使用1 mL 玻璃/石英比色皿皿（光徑=1 cm）、200 μL 微量玻璃/石英比色皿（光徑=1 cm）、普通/UV微孔板（光徑=0.5 cm）。
問題三
問：elisa檢測試劑盒離心轉速和離心力如何設置? 答：說明書中轉速有離心力（×g）和每分鐘轉速（rpm）兩種表示方式，具有自動切換功能的可直接設定相應轉速 （rpm 或×g），若需要手動轉換可參照下列公式計算：g=r*11.18*10^-6*rpm^2*注釋：r為有效離心半徑（即離心機軸心到樣品中心位置的長度），單位厘米。
問題四
問:elisa檢測試劑盒分光光度法和酶標儀法試劑盒能否通用？ 答：不可以通用，兩種試劑盒根據不同的檢測環境設計了相應的反應體系和試劑濃度，并按照標準流程進行開發和， 每種試劑盒均有相應的驗證數據，若用戶自行混用，公司將無法提供相應的技術支持。
問題五
問：elisa檢測試劑盒種試劑變色后還可以使用嗎？ 答：不可以，使用前需要注意觀察試劑顏色，若出現變色后則停止使用。
問題六
問：elisa檢測試劑盒按照說明書冷藏后出現沉淀的試劑還可以用嗎？ 答：可以，試劑盒中含有濃度較高或過飽和試劑，低溫會導致溶解度下降進而出現沉淀，建議將試劑恢復至室溫，振蕩 溶解后使用，若無法解決請及時與技術專員聯系。
問題七
問：elisa檢測試劑盒可以改變說明書中加試劑順序嗎？ 答：不可以，否則可能造成反應不能正常進行而導致測定失敗。
問題八
問：elisa檢測試劑盒吸光度特別高怎么辦？ 答：檢測吸光值應處于標準吸光值線性范圍內或符合說明書注意事項中對最高吸光值的要求，若超出規定值應將待測 樣品進行適當稀釋后再進行檢測；也可聯系公司工作人員提供相應的技術支持。 特別注意：紫外分光光度法應使用石英比色皿，若吸光值異常高（吸光值≥3），則表明所使用的是玻璃比色皿或 普通酶標板，需進行更換，同時檢查比色皿潔凈度和使用規范。
問題九 問：elisa檢測試劑盒為什么?A 會接近于零？ 答：①排除試驗異常情況且復測后?A 仍趨于零，表明反應不能發生：如果是測定酶活性，表明樣品可能沒有酶活性； 如果是測定某種物質，則表明該樣品可能不含有此種物質。 ②體系中還發生了其它干擾反應，該反應的底物或者 產物在該波長下也有光吸收，并且變化方向相反，幾乎抵消了正常酶反應，可以通過設置新的對照排除。 ③樣品 保存不當造成預期指標發生改變，需仔細檢查樣品處理、采集和保存以及提取狀況。
問題十
問：elisa檢測試劑盒為什么?A 會出現負值？ 答：①可逆反應造成：可以通過適當縮短反應時間來防止逆反應的發生； ②體系中發生其它干擾反應：該反應的底物 或者產物在該波長下也有光吸收，并且變化方向相反，超過了正常反應，可以通過設置新的對照排除。 ③反應體系 中存在不溶物或者氣泡：顆粒沉淀或者氣泡破裂后會導致吸光度顯著下降，出現負值，顆粒通常來源于樣品粗提 液，可以提供再次離心，確保得到澄清的上清液；氣泡可能在反應體系中產生，可以通過降低反應速度。
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